放射免疫計數(shù)器是一種用于檢測和定量分析放射性同位素標(biāo)記物(如¹²?I、³H、¹?C等)所發(fā)射射線的精密儀器,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗、生命科學(xué)研究、藥物開發(fā)及臨床診斷等領(lǐng)域,尤其在放射免疫分析(RIA)和免疫放射分析(IRMA)中發(fā)揮核心作用。
該設(shè)備主要通過探測樣品中放射性核素衰變釋放的γ射線或β粒子,將其轉(zhuǎn)化為可測量的電信號,并經(jīng)放大、甄別和數(shù)據(jù)處理后,計算出樣品的放射性強(qiáng)度(通常以cpm或dpm表示),從而間接反映待測抗原或抗體的濃度。對于γ射線(如¹²?I),常采用NaI(Tl)閃爍晶體與光電倍增管組成的探測系統(tǒng);而對于低能β射線(如³H、¹?C),則多使用液體閃爍計數(shù)技術(shù),將樣品與閃爍液混合后進(jìn)行高效探測。
一、操作前準(zhǔn)備
環(huán)境檢查
確保實驗室環(huán)境清潔、干燥,通風(fēng)良好,避免潮濕或灰塵干擾儀器運行。
檢查儀器是否放置在穩(wěn)定的工作臺上,遠(yuǎn)離振動源和強(qiáng)電磁場(如大型設(shè)備、手機(jī)等)。
設(shè)備預(yù)熱與校準(zhǔn)
打開儀器并預(yù)熱至穩(wěn)定狀態(tài)(通常需10-30分鐘),確保探測器(如碘化鈉晶體與光電倍增管)達(dá)到最佳靈敏度。
使用標(biāo)準(zhǔn)放射性源進(jìn)行校準(zhǔn),驗證本底計數(shù)率(通常≤70 CPM)和活度響應(yīng)(如≥0.76 S?¹·Bq?¹),確保測量準(zhǔn)確性。
個人防護(hù)
穿戴實驗室外套、護(hù)目鏡、手套和實驗室鞋,避免皮膚直接接觸放射性物質(zhì)。
操作前確認(rèn)放射性物質(zhì)儲存容器密封性,防止泄漏。
二、樣品處理與測量
樣品標(biāo)記與純化
使用放射性同位素(如¹²?I)標(biāo)記抗體或抗原,確保標(biāo)記物活性穩(wěn)定。
通過離心、過濾等方法去除樣品中的雜質(zhì)(如蛋白質(zhì)沉淀、細(xì)胞碎片),避免干擾測量。
參數(shù)設(shè)置
根據(jù)樣品類型選擇合適的放射性核素(如¹²?I、¹³¹I、??Cr等),并設(shè)置對應(yīng)的能量窗口(如0.4-4.8伏對應(yīng)8-96 keV能量射線)。
設(shè)定計數(shù)時間(通常30-60秒/樣品)和測量模式(如單管或雙管測量),平衡效率與精度。
樣品放置與測量
將樣品放入專用試管或孔板中,確保與探測器接觸面積z大化(如使用大直徑光電倍增管)。
避免劇烈攪拌或震動樣品,防止放射性標(biāo)記物分布不均影響結(jié)果。
測量過程中,儀器會自動記錄γ射線計數(shù),并通過軟件轉(zhuǎn)換為濃度值(如使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或比較法)。
三、數(shù)據(jù)處理與安全
數(shù)據(jù)記錄與分析
保存原始計數(shù)數(shù)據(jù),并通過軟件生成標(biāo)準(zhǔn)曲線或計算濃度值。
對復(fù)管樣品取平均值,提高檢測準(zhǔn)確度(如復(fù)管數(shù)最高可設(shè)為4個)。
輻射安全措施
操作后及時清理工作區(qū)域,使用專用工具處理放射性廢物(如廢液、廢試管),避免污染環(huán)境。
定期檢查儀器屏蔽性能(如鉛室、鉛套),確保輻射泄漏量低于安全限值。
操作人員需接受專業(yè)培訓(xùn),持有放射技術(shù)證書,并定期進(jìn)行健康檢查。
四、維護(hù)與故障排除
日常維護(hù)
清潔儀器表面和樣品艙,避免灰塵或殘留物影響探測器靈敏度。
檢查電路連接是否正常,更換老化部件(如光電倍增管、晶體)。
常見故障處理
計數(shù)異常:檢查放射性源是否衰變或位置偏移,重新校準(zhǔn)儀器。
本底升高:清理探測器周圍環(huán)境,檢查屏蔽材料是否損壞。
軟件錯誤:重啟儀器或更新軟件版本,確保數(shù)據(jù)接口兼容性。
五、進(jìn)階功能利用
多項目自動測量
使用條碼閱讀技術(shù)實現(xiàn)多項目自動排隊(如一次設(shè)置10個檢測項目),提高效率。
選擇多種檢測模式(如放射免疫、免疫放射、肝炎系列等),適應(yīng)不同實驗需求。
質(zhì)控與數(shù)據(jù)管理
利用質(zhì)控分析功能(如批間質(zhì)控、精密度圖)監(jiān)控儀器穩(wěn)定性。
通過數(shù)據(jù)傳輸功能(如網(wǎng)絡(luò)共享)實現(xiàn)遠(yuǎn)程協(xié)作或長期數(shù)據(jù)存儲。
